El agar de papa dextrosa (PDA) es un buen medio semisólido de uso general utilizado para el cultivo de hongos. A menudo se usa para aislar, cultivar y mantener especies formadoras de hongos. Se pueden comprar placas de Petri preparadas o tubos de ensayo que contienen PDA, o se puede hacer PDA rápidamente usando una premezcla comercial. Sin embargo, no es difícil hacer una versión simple y efectiva desde cero a bajo costo.
crédito: Zedcor de propiedad absoluta / PhotoObjects.net / Getty ImagesPreparar extracto de papa
Paso 1
Coloque las papas en una cacerola con aproximadamente 1,2 litros de agua del grifo y hierva en una estufa durante 1 hora.
Paso 2
Retire la cacerola del fuego y deje que el líquido se enfríe hasta que pueda manipularse cómodamente (aproximadamente 10 minutos).
Paso 3
Vierta el extracto líquido de papa a través de un colador o una gasa y recójalo en otro recipiente.
Preparando el medio
Paso 1
Agregue dextrosa y agar a 1 litro de agua de extracto de papa.
Paso 2
Pruebe el pH de la solución con papel de prueba de pH o un medidor de pH.
Paso 3
Si el pH está por encima de 6.5, ajústelo agregando una gota de la solución de ácido clorhídrico a la vez y vuelva a probar.
Paso 4
Si el pH está por debajo de 6, ajústelo agregando una gota de la solución de hidróxido de sodio a la vez y vuelva a realizar la prueba.
Esterilización
Paso 1
Mezcle bien el medio y divídalo en lotes más pequeños de 250 ml vertidos en los cuatro matraces de 500 ml (Nota: cada matraz no debe tener más de la mitad para evitar que hierva).
Paso 2
Cubra cada matraz con un trozo de papel de aluminio ligeramente ondulado, para que el papel no se caiga, pero no selle herméticamente.
Paso 3
Coloque los matraces en una olla a presión.
Paso 4
Opere la olla a presión de acuerdo con las instrucciones del fabricante para esterilizar el PDA a 121 grados C (250 grados F) a una presión de 103,421 Pascales (15 PSI) durante 15 minutos.
Paso 5
Apague la olla a presión y deje que vuelva a la presión atmosférica, luego retire los matraces y deje que se enfríen hasta que puedan manipularse.
Vertiendo el medio
Paso 1
Alinee las placas de Petri estériles en una superficie plana.
Paso 2
Una vez que los matraces se hayan enfriado a la temperatura de manipulación, pero antes de que el medio comience a solidificarse, tome un matraz con una mano y retírelo y reserve la tapa de aluminio con la otra mano.
Paso 3
Para cada placa de Petri, levante la tapa con una mano, llene rápidamente hasta la mitad con PDA líquido y vuelva a colocar la tapa.
Paso 4
Repita el paso 3 anterior hasta que se llenen todos los platos de Petri
Paso 5
Si queda algo de PDA, recupere sin apretar el matraz con su tapa de aluminio original, déjelo enfriar y solidifique, apriete la tapa de aluminio y guárdelo en el refrigerador.
